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本文标题:"光学分辨率受什么限制?"

光学分辨率受什么限制?

光学分辨率的限制,大小对象可以被检测到,但差解决在较厚的标本上,如细胞和组织中,它是可能重复采样的,依次使每个光学部分纳入到z系列( 或 z 堆栈)的深层。

配备有电脑控制步进电机的显微镜获得的图像,然后根据采样参数进行细微的焦点,另一幅图像可以继续直到已经收集了足够多的光学部分。步长可调,将取决于二维成像,在适当的奈奎斯特采样。

轴向分辨率的极限大于横向分辨率的限制。这意味着的体素可能不等于双面立方体,将有一个z维度比的 x 和 y 的尺寸可以大几倍。

例如,样品可以分为5微米厚的光学部分,并以20微米的间隔取样。如果x和y的尺寸是0.5微米×0.5微米,那么所得到的体素将40倍的时间比它宽。

可以进行三维成像与传统的宽视场荧光显微镜配备了一个机制,以获得连续的光学部分。焦平面中的对象被暴露于的照明源和从荧光团发射的光由检测器的收集。

重复该过程,在沿z 轴的细焦点的间隔 ,通常几百次,和光学部分或 z 系列的序列被生成。厚的生物样品,在宽视场成像模糊的光分散可以降低图像质量。在所有方面。

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