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本文标题:" 可溶性蛋白质之电泳分析,sw显微镜哪有卖?"

 可溶性蛋白质之电泳分析

1.取0.2毫升蛋白液(蛋白质萃取)于Microfuge tube再加入0.2毫升SDS-溶解液(含追踪剂)。
2.于100℃水浴加热10分钟,分别取5、10、20及30µl注入15﹪SDS-polyacrylamide gel (SDS PAGE)。
3.装置电泳槽时,将双片玻璃与Spacer依说明装好锁紧,务必添加水测验是否会漏水。依配方配40毫升(可配2片)先用真空抽气再加APS,随即以玻璃吸管注胶,加完后再加一层水至玻璃表面。约经25-30分钟,观察水胶介面形成后,倒除水层。
4.依配方及相同步骤配制聚集胶,倒入后将Comb插入。经约25-30分钟凝胶后,拔出Comb,加入Tris-buffer于 well中备用。
5.放入电泳槽,倒入Tris-buffer于上槽及下槽。
6.盖紧槽盖(注意正负极)以200V running 约45分钟,以染液(Pierce Gel-Code Staining Solution)染色1小时。以清水脱色至蓝色背景消失可观察检视或照相。
 
配制药品:pH7.9, 0.2M磷酸缓衝溶液
称取Na2HPO4 26.688g、NaH2PO4 1.872g加H2O溶液后调pH至7.9,再量至1000毫升。
 

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